日本视频在线播放 I 国产人体视频 I 亚洲欧美色综合 I 最近最新中文字幕视频 I 粉嫩av一区二区三区 I 777www色69堂 I 国产美女mm131爽爽爽免费 I 91片黄在线观看 I 天天cao在线视频 I 香蕉精品999视频一区二区 I 欧美日韩亚洲国产综合 I 韩国美女被c视频 I 9l视频自拍蝌蚪9l视频在线看 I 日韩亚洲欧美中文高清在线 I 极品少妇xxxx精品少妇偷拍 I 亚洲制服欧美另类 I 天天看片导航 I 日本亚洲精品在线观看 I 亚洲二区在线观看 I 欧美啪啪网站 I 在线亚洲一区 I 蒂蒂有话说动画免费观看 I 男人进入女人下体视频 I 99久久久精品免费观看国产 I 五月天色网站 I 欧美激情视频给我 I 麻豆av在线播放 I 精东影业av一区 I 婷婷综合六月 I 91丨精品丨蝌蚪丨白丝jk I 九色国内视频自拍蝌蚪 I 亚洲国产欧美一区二区丝袜黑人 I 中国女人高潮dh

在間接法和夾心法ELSIA中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競賽法ELISA中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反響的成果判別辦法不一樣，分述于下。
（1）間接法和夾心法
這類反響的定性成果能夠用肉眼判別。目視標本也無色或近于無色者判為陰性，顯色明晰者為陽性。但在ELSIA中，正常人血清反響后常可呈現呈色的本底，此本底的深淺因試劑的構成和試驗的條件不一樣而異，因而試驗中有必要加測陰性對照。陰性對照的構成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判別成果時，更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的目標。
目視法簡捷明晰，但頗具主觀性。在條件許可下，應該用比色計測定吸光值，這么能夠得到客觀的數據。先讀出標本（sample，S）、陽性對照（P）、和陰性對照（N）的吸光值，然后進行核算。核算辦法有多種，大致可分為陽性斷定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
a．陽性斷定值
陽性斷定值（cut-off value）通常為陰性對照A值加上一個特定的常數，以此作為判別成果陽性或陰性的規范。
ELISA試劑盒用此法判別成果請求試驗條件十分穩定，試劑的制備有必要規范化，陽性和陰性的對照品應契合必定的規范，須配用精密的儀器，并嚴厲按規則操作。陽性斷定值公式中的常數是在這特定的體系中經過對很多標本的試驗查看而得到的。現舉某種查看HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng /ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后，先核算陰性對照A值的平均數（NC X ）和陽性對照A值的平均數（PCX），兩個平均數的差（P-N）有必要大于一個特定的數值（例0.400），試驗才有用。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其間之一超出此規模，則棄去，而以另兩個陰性對照從頭核算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上規模，則該次試驗無效。陽性斷定值按下式核算：
陽性斷定值=NCX+0.05
標本A值＞陽性斷定值的為陽性，小于陽性斷定值的為陰性。應留意的是，式中0.05為該試劑盒的常數，只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用。
依據以上敘說能夠看出，在這種辦法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控效果，試劑蛻變和操作不妥均會發作"試驗無效"的后果。
b.標本/陰性對照比值
在試驗條件（包含試劑）較難確保穩定的情況下，這種判別法較為適宜。在得出標本（S）和陰性對照（N）的A值后，核算S/N值。也有寫作P/N的，這兒的P不代表陽性(positive)，而是患者（patient）的縮寫，不該誤解。為防止混雜，更宜用S/N表明。在早期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽性規范，現多為各種測定所沿襲。實際上每一測定體系應該用試驗求出各自的S/N的閾值。更應留意的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液，致使反響后發作的本底也許較正常人血清的本底低得多。因而，這類試劑盒規，如N<0.05<>（或別的數值），則按0.05核算，否則將呈現假陽性成果。
（2）競賽法
在競賽法ELISA中，陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反響中酶物的濃度和參加競賽按捺物的量，通常調理陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間，此刻反響zui為靈敏。
競賽法ELISA不易用自視判別成果，因肉眼很難區分弱陽性反響與陰性對照的顯色區別，通常均用比色計測定，讀出S、P和N的吸光值。核算辦法首要也有兩種，即陽性斷定值法和按捺率法。
a. 陽性斷定值法
與間接法和夾心法中的陽性斷定值法根本一樣，但在核算公式中引進陽性對照A值，現舉某種查看抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿，陽性對照中抗HBc含量為125±1 00u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后，先核算陰性對照A值的平均值（NC X ）和陽性對照A值的平均數（PCX），兩個平均數的差（N-P）有必要大于一個特定的數值（例如0.300）,試驗才有用。3個陰性對照A值均應小于2.000，并且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如其間之一超出此規模，則棄去，而以另2個陰性對照從頭核算×NCX；如有2個陰性對照A超出以上規模，則該次試驗無效。陽性斷定值按下式核算：
陰性斷定值=0.4×NCX+0.6×PCX
標本A值≤陽性斷定值的反響為陽性，A＞陽性斷定值的反響為陰性。
b. 按捺率法
按捺率表明標本在競賽中標本對陰性反響顯色的按捺程度，按下式核算：
按捺率（%）= （陰性對照A值-標本A值）×100%/陰性對照A值
通常規則按捺率≥50%為陽性，＜50%為陰性。
定量測定
ELISA試劑盒操作進程復雜，影響反響要素較多，特別是固相載體的包被難到達各個別之間的共同，因而在定量測定中，每批測驗均須用一系列不一樣濃度的參閱規范品在一樣的條件下制造規范曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA，規范曲線的規模通常較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，制作時常用半對數紙，以查看物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線通常呈S形，其頭、尾部曲線趨于平整，中心較呈直線的有些是的查看區域。
測定小分子量物質常用競賽法，其規范曲線中吸光度與受檢物質的濃度呈負相關。規范曲線的形狀因試劑盒所用形式的不同而略有不一樣。